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基礎(chǔ)款細(xì)胞電轉(zhuǎn)儀SP100

適用于血液系統(tǒng)領(lǐng)域轉(zhuǎn)染

干細(xì)胞領(lǐng)域轉(zhuǎn)染
各種細(xì)胞系轉(zhuǎn)染
原代細(xì)胞轉(zhuǎn)染
神經(jīng)、心血管研究領(lǐng)域轉(zhuǎn)染

          聯(lián)系人:文女士
          電話:0755-26410427
          郵箱:equipment@dakewe.com

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產(chǎn)品介紹

圖片1.png

基礎(chǔ)款細(xì)胞電轉(zhuǎn)儀SP100


產(chǎn)品基本信息:

品牌:Celetrix

型號(hào):SP100

貨號(hào):11-0103


特點(diǎn):

  1. 1. 界面簡(jiǎn)潔、操作簡(jiǎn)單,   

  2.  2.可適配20ul、100ul電擊管;

  3. 3.全新密封加壓型電擊管設(shè)計(jì):均勻電場(chǎng)從管蓋到管底。可承受電轉(zhuǎn)產(chǎn)生氣體之壓力,在電轉(zhuǎn)瞬間壓縮氣泡,保證電場(chǎng)均勻;

  4. 4.適用于原代細(xì)胞,包括T,B細(xì)胞和神經(jīng)細(xì)胞等。原代細(xì)胞質(zhì)粒電轉(zhuǎn)化率為50-80%,mRNA或者Cas9蛋白做基因編輯電轉(zhuǎn)效率可達(dá)90%以上;

  5. 5.電脈沖參數(shù)設(shè)定方便,內(nèi)部電路反應(yīng)迅速,設(shè)定完成即可啟動(dòng),瞬間完成電轉(zhuǎn)。


--------------------------------------------------------------關(guān)于Celetrix電轉(zhuǎn)儀系列-----------------------------------------------------------------


【原理】

Celetrix電轉(zhuǎn)技術(shù)即第三代電轉(zhuǎn)全新加壓電轉(zhuǎn)染技術(shù),是通過(guò)對(duì)密封的電擊管進(jìn)行加壓電擊,產(chǎn)生的瞬間電流把一端的細(xì)胞膜打開,幾十毫秒內(nèi)外源物質(zhì)(DNA,protein, etc.)進(jìn)入細(xì)胞膜內(nèi),細(xì)胞膜再次瞬間關(guān)閉,最終使得外源物質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)表達(dá)。


圖片6.jpg

【技術(shù)對(duì)比】

圖片5.jpg圖片3.jpg圖片4.jpg

1) 電擊管:兩端少量氣泡被壓縮,接近100%都是均勻有效區(qū),可能是最后一代電轉(zhuǎn)技術(shù)。
2) 電極杯:有三點(diǎn)缺陷:①液面翹角處相當(dāng)于電阻并聯(lián),阻值變小,分到的電壓偏小,細(xì)胞不能電轉(zhuǎn)。  ②由于兩端總電壓相等,液面凹面下方分到的電壓增加導(dǎo)致此處細(xì)胞死亡。 ③下方液面電壓分配比較均勻,均勻有效區(qū)小。
3) 毛細(xì)管:有明顯的缺陷, ①區(qū)有效時(shí),②區(qū)③區(qū)細(xì)胞無(wú)效;②區(qū)有效時(shí),①區(qū)細(xì)胞死亡,③區(qū)無(wú)效。③區(qū)有效時(shí),①區(qū)和②區(qū)細(xì)胞死亡。①②③區(qū)只能選一個(gè)最佳,不好兼顧。另外,毛細(xì)管沒(méi)有壓力,氣泡影響特別大,造成電弧、實(shí)驗(yàn)失敗等。

圖2.png


【服務(wù)領(lǐng)域】


image.png image.png image.png

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輕松電轉(zhuǎn)所有細(xì)胞系(貼壁與懸浮細(xì)胞)與原代真核細(xì)胞:

圖片10.jpg

【應(yīng)用領(lǐng)域】

1. 細(xì)胞免疫治療新時(shí)代

(1)PBMC使用普通GFP質(zhì)粒電轉(zhuǎn)結(jié)果與流式分析圖

1.png

普通GFP質(zhì)粒電轉(zhuǎn)24h后效率大于80%


(2)PBMC使用SB轉(zhuǎn)座子系統(tǒng)表達(dá)CAR-T2A-GFP結(jié)果

2.png

PBMC電轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)座子14天后的CAR表達(dá)效率為65.9%,并且細(xì)胞狀態(tài)和未電轉(zhuǎn)的一樣穩(wěn)定快速聚集生長(zhǎng)

 

(3)7天擴(kuò)增的NK細(xì)胞電轉(zhuǎn)后第7天(總培養(yǎng)14天)CD56-PE染色分析

 3.png

電轉(zhuǎn)GFP轉(zhuǎn)座子兩個(gè)質(zhì)粒7天后,細(xì)胞用CD56-PE染色分析;NK細(xì)胞比例大約有86%;其中GFP陽(yáng)性的有68%,比第四天稍有下降




2.基因編輯

基因編輯1.png

電轉(zhuǎn)Cas9和gRNA(+)或者Cas9蛋白,通過(guò)T7E1核酸內(nèi)切酶檢測(cè)基因編輯效率,在APP, AAVS1, OCT4和PDCD1四個(gè)基因位點(diǎn)的編輯效率均超過(guò)50%,其中AAVSl基因位點(diǎn)編輯效率能達(dá)到70%


3.抗體生產(chǎn)

抗體1.png


CHO細(xì)胞電轉(zhuǎn)6kb小質(zhì)粒瞬轉(zhuǎn)效率>99%
普通質(zhì)粒瞬轉(zhuǎn)表達(dá)抗體
轉(zhuǎn)座子高效整合系統(tǒng)表達(dá)抗體

抗體2.png


CHO細(xì)胞電轉(zhuǎn)11kb較大質(zhì)粒瞬轉(zhuǎn)效率>80%
GFP, mCherry代替HC,LC
含有GS篩選標(biāo)記可做穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株

 
4.干細(xì)胞電轉(zhuǎn)
Human iPSC 高效電轉(zhuǎn)、保持未分化狀態(tài),可進(jìn)行基因編輯
ACS-1030 transfection with GFP plasmid 72 hours(SBI, Coriell iPSC similar)

干細(xì)胞2.png



【電轉(zhuǎn)體系】
基礎(chǔ)款細(xì)胞電轉(zhuǎn)儀SP100:20ul、100ul兩個(gè)電轉(zhuǎn)體系;


升級(jí)款細(xì)胞電轉(zhuǎn)儀LE+:20ul,120ul,200ul三個(gè)電轉(zhuǎn)體系;


升級(jí)款細(xì)胞電轉(zhuǎn)儀EX+:可適配20ul、100ul、200ul、600ul、1ml電擊管;


大體積細(xì)胞電轉(zhuǎn)儀SLT:可適配200ul、1ml、5ml、10ml電擊管;


超高壓細(xì)菌、酵母電轉(zhuǎn)儀UHV:酵母電轉(zhuǎn)可適配20ul、100ul、200ul和1ml;細(xì)菌電轉(zhuǎn)可適配20ul,100ul,600ul;


細(xì)菌、酵母、細(xì)胞電轉(zhuǎn)一體機(jī)UHV-Plus:酵母電轉(zhuǎn)可適配20ul、100ul、200ul和1ml;細(xì)菌電轉(zhuǎn)可適配20ul,100ul,600ul;細(xì)胞電轉(zhuǎn)可適配20ul電擊管,細(xì)胞量0.5-3X10^6



【產(chǎn)品參數(shù)】

參數(shù).png



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